细胞迁移试验

除了通过在血液中行驶的所有角落携带氧气的红细胞,大部分弥补生物体的大多数细胞,而不从他们的特定位置移动它们的功能。相比之下,存在在血液和身体组织中主动行驶的细胞,例如免疫细胞。此页面介绍了用于评估它们的细胞迁移和测定。

细胞迁移以及如何评估它

细胞迁移是指细胞从一个位置移动到另一个位置。例如,在伤口愈合的过程中,可以观察到细胞迁移,如表皮上的划伤或小伤愈合。当皮肤遭受创伤时,血液中的凝血因子被激活,在伤口部位形成血块,以阻止出血(凝血阶段)。接下来,作为免疫反应的一部分,炎症细胞,如中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞迁移到伤口并清除坏死组织(炎症期)。巨噬细胞释放的物质招募该区域的成纤维细胞迁移到伤口,生成修复所需的胶原,并促进血管生成形成肉芽组织(增殖阶段)。最后,表皮组织细胞迁移,使伤口边缘收缩和闭合(重塑期)。伤口通过这些阶段愈合。

细胞游走于细胞外基质(ECM)并穿透邻近组织称为细胞入侵。例如,当细菌或病毒感染引起炎症时,作为机体防御反应的一部分,中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等炎症细胞密集地向炎症部位迁移,浸润炎症组织,引起炎症细胞浸润。其他类型的细胞侵袭包括肿瘤侵袭(癌细胞侵袭),肿瘤细胞如癌细胞浸润并扩散到邻近的组织或器官。

细胞迁移在伤口愈合,细胞分化和胚胎发育中起着重要作用。另一方面,如果在细胞迁移期间发生某种错误,则可能导致严重的结果,例如肿瘤形成,肿瘤转移和/或癌症转移。因此,细胞迁移涉及体内的不同过程。

细胞迁移测定的类型

细胞迁移试验允许您检查迁移能力或入侵机制的研究目标细胞,或研究促进细胞迁移和入侵的因素和条件。细胞迁移试验用于研究药物和化妆品引起的细胞迁移增强,用于研究肿瘤和癌症转移,研究和开发药物控制它们,以及其他治疗方法。本节介绍用于测量和评估细胞迁移和侵袭的典型细胞迁移测定方法。

趋化性试验

免疫细胞如白细胞(中性粒细胞),巨噬细胞和淋巴细胞,以及成纤维细胞,内皮细胞,上皮细胞和肿瘤细胞,是趋化细胞,或根据周围存在的某些化学物质的浓度梯度迁移的细胞他们。它们的细胞迁移由趋化因子 - 一种细胞因子和其他化学引发作为趋化因子触发。当细胞迁移朝向更高的化学浓度发生时,它被称为阳性趋化性。当细胞迁移朝向较低的化学浓度发生时,它被称为阴性趋化性,以及引起这种反应的化学物质称为化学细胞。在检查趋化性的细胞迁移测定中,通过孔内部的细胞在井内穿过膜插入并粘附到沉积物中置入趋化因子的底部,是迁移细胞,并且不通过膜插入物并保留在过滤器上方的细胞是非迁徙细胞。

趋触性试验

在评估粘附性的细胞迁移试验中,一种膜插入物,其底部(背面)被胶原蛋白或纤维连接蛋白-趋化剂覆盖,这些趋化剂对成纤维细胞、内皮细胞、上皮细胞被放置在一个孔中,检查细胞是否被这些化学物质吸引并向这些化学物质迁移,以确定这些细胞是触控性还是非触控性。此外,结合到ECM或细胞粘附部位的趋化剂浓度梯度可以用来测量不同细胞的迁移能力。

伤口愈合实验

这是一种体外测定,可复制多孔板中的伤口愈合条件。在称为划痕测定的典型方法中,测量迁移和渗透故意制造伤口的免疫细胞进行评估。测量伤口修复中的细胞浸润,包括伤口愈合中的组织基质产生,所涉及的细胞的差异以及不同培养条件下的细胞增殖和浸润,可用于药物的研究,开发和评估。

细胞入侵检测

癌细胞最终从最初形成的地方分离出来,通过破坏基底膜渗透到邻近的组织中。然后癌细胞迁移到血管中,通过血液转移到身体的不同部位。当癌细胞在被携带到的地方增殖时,就会发生癌症转移。当癌细胞浸润组织时,在细胞粘附、基底膜和细胞外基质中发生蛋白水解和细胞迁移。利用这一特性,可以使用涂有胶原蛋白、层粘连蛋白或基膜基质溶液的膜插入物来识别和测量细胞肿瘤。通过使用24孔或96孔板在促进细胞浸润的体外环境中测量浸润细胞,可以评估细胞浸润,并研究可以抑制浸润的物质。细胞培养后染色,以确定和量化细胞肿瘤。

评估单元迁移能力及其解决方案中的问题188金宝搏官方app下载

细胞迁移检测是通过使用合适的检测试剂盒,通过测量细胞迁移和浸润来评估细胞迁移能力和其他特性。24孔板或96孔板用于确保相同环境条件下所需的样品数量,但使用常规显微镜和手动计数器分析和测量大量的样品需要花费大量的时间和精力。同时分析和测量许多井中活细胞的状态和变化不仅困难,而且容易受到与人类相关的测量误差和评价变化的影响。即使使用自动细胞计数器,转移含有活性细胞的样品也会很麻烦。在某些情况下,仅仅根据大小来识别不同的细胞是很困难的。

准确地分析和评估细胞迁移

KEYENCE公司的BZ-X800一体化荧光显微镜可以对多孔板的每一口井进行自动连续延时成像和视频捕捉。自动对焦和全对焦功能帮助您捕捉每个井的清晰图像或视频。
视频捕获后,您可以使用分析应用程序在许多井中的每一个运行视频分析(运动分析)。只需单击测量目标来指定分析范围,您可以分析细胞迁移功能,例如Chemotaxis和Haptotaxis,同时通过自动跟随目标获取的位置坐标的更改。时间流逝图像捕获和视频捕获允许您在成像正在进行的成像时,即使正在进行成像,允许您在某些间隔中看到细胞迁移和渗透的进度。

混合细胞计数功能准确地只测量每个孔中信号部分的面积。宏单元格计数功能提供了自动测量,用户只需要测量单个图像,就可以将相同的条件应用到其他图像,这使得快速定量测量成为可能。
BZ-X800提供了广泛的功能,不仅大大缩短和简化了以前用于评估多孔板中细胞迁移和渗透的分析任务的时间,而且由于其精确的定量测量,还有助于提高分析数据的可靠性。

准确地分析和评估细胞迁移

使用全功能荧光显微镜BZ-X800

Baidu