更有效的菌落计数和面积测量

在评价食品、化妆品和药品安全性的微生物和遗传毒性检测中，如何有效地进行全孔板观察、准确分析和菌落定量评价是一个问题。在再生医学研究中，有各种积极的实验和研究，将诱导多能干细胞(iPS细胞)的新疗法和治疗药物应用到实际应用中。上述问题出现在通过计数和测量菌落来评估iPS细胞培养和维护过程中的形成的研究中。
以下部分介绍了使用荧光显微镜在孔板上进行iPS细胞的菌落计数和面积测量的示例解决方188金宝搏官方app下载案，该荧光显微镜可以使用大型机动舞台观察整个孔板。

菌落计数和面积测量中的问题
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菌落计数和面积测量中的问题

实施微生物和基因毒性检测，确保产品安全。在微生物试验中，在规定的时间间隔内对培养基中的活菌菌落数进行计数，并计算出用于评价的细菌数量。在一种基因毒性测试——艾姆斯测试中，突变诱导是根据菌落和它们的比例来评估的，当一种测试物质被给予一种本来不能自己产生氨基酸的菌株时。
在这两种试验中，都需要区分和测量活细胞和细菌的菌落，它们在孔板上增殖并随时间变化。然而，通过测试人员的目视菌落计数，几乎不可能在数值上没有变化或错误地分析和评估所有的孔板。另一个重要的问题是，在小视场的高倍放大下观察和计数菌落时，很难立即了解整个井板的状态。这项耗时的工作也存在丢失部分井板的风险。

在再生医学研究中，观察整个孔板并准确分析iPS细胞的集落形成是定量评价实验结果的必要条件。为了使栽培过程更好、更高效，在不同条件下，从栽培到介质交换和传代，每个步骤的数据积累也很重要。
在群体计数中，不同操作符的结果差异往往是妨碍准确数据积累的一个因素。这个问题更可能发生在iPS细胞在维护和培养过程中增殖时，因为菌落中的细胞形状发生了变化。细胞之间的边界可能会变得模糊，这使得视觉计数更加困难，导致测量和评估过程中的人为错误。

这个问题有更深远的影响:当发现人工计数错误或自动计数错误检测时，需要花费大量的时间和精力重新进行分析和测试。为了避免将有限的工作人员的时间和精力浪费在检查、测试和实验上，并产生尽可能多的结果，必须提高数据的准确性和工作效率。

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KEYENCE公司生产的BZ-X800多功能一体机荧光显微镜具有多功能性，可同时进行荧光、亮场、相位差观测和多种成像方法。BZ-X800可以观察整个孔板，进行菌落定量计数和面积测量，解决实验、研究、试验和检查中的各种问题。
介绍使用BZ-X800的优点和各种应用实例。

使用大型机动平台对整个井板的观察

在显微镜高倍镜下观察菌落时，由于高倍镜下视野狭窄，需要在记录舞台坐标的同时反复观察孔板部位。在高倍镜下，不可能同时观察整个孔板和精细菌落。在某些情况下，为了获得大视场的图像，需要通过图像处理将高倍放大的图像手工拼接成单个图像，这既困难又耗时。观察整个孔板的一个问题是，如何尽可能快地观察，而不受随时间变化的活细胞和细菌的影响。

BZ-X800具有图像拼接功能，控制大型电动舞台在X、Y、z轴方向上自动捕捉高倍图像，并将其拼接在一起，便于获取整个井板的高分辨率图像。可以无缝切换整个井板的大视场观察和高倍放大的菌落位置观察，可以实现平滑的观察，不会忽略任何已经形成的菌落或丢失观察坐标。
此外，图像拼接还可以用于多井板上的多井同时自动处理。

在整个孔板上简化iPS细胞集落计数和面积测量的例子

活细胞和细菌随时间变化，影响孔板分析和评价的结果，因此快速获得定量分析结果至关重要。
下面的图像是用BZ-X800拍摄的，展示了一个使用混合细胞计数(Hybrid Cell Count)对使用图像拼接获得的iPS细胞的整个孔板进行自动菌落计数和面积测量的例子。通过对整个井板的宽视场观测，可以定量测定菌落数量、平均面积、标准面积偏差和总面积，快速提供分析结果。这可以节省大量手工计数所需的时间和精力，也消除了人为错误的风险。